那時,彼得進前來,對耶穌說:「主啊,我跑PCR若失敗了,我當重跑幾次呢?到七次可以嗎?」 耶穌說:「我對你說,不是到七次,乃是到七十個七次。」
PCR(聚合酶連鎖反應),是利用懂得複製DNA的「聚合酶」,不斷將指定DNA複製倍化的過程。COVID的PCR檢測,就是以此技術為基礎,加上螢光訊號,讀出DNA相對的含量。
那麼,聚合酶如何知道複製什麼片段?就是靠一對稱為引物(Primer)的短序列片段,一個標註起始序列,一個標註結束聚列。這就像Word的find功能,請你幫我從「so I say I love you」,複製到「笑著去吃苦」。不過,這只是完美情況的講法,因為引物可能會有偏差,把”so I say I f**k you”開始的片段也複製出來,況且,本來就有很多歌有”so I say I love you”,就算不偏差,也會複製錯別的歌。
要知道跑出來的東西是否正確,其中一個方法,是把成品DNA放在大菜糕上,用電場使本帶負電荷的DNA從負極游泳泳到正極。由於不同大小的DNA,游泳速度是不同的,可以藉此看到DNA大小。如果你看到是37字大小的DNA,就知道複製對了姜B的歌。這方法叫電泳(electrophoresis),不過無論中英我們也會說DNA在「跑」。
圖中就是最後一次PCR實驗的電泳結果。這週,我共試了五對Primers,八個溫度設定,兩種聚合酶,總共跑了七個七次,終於跑出一點結果。上面那排,是基於兩篇不同文章,分別發表,聲稱有用的Primers,跑出狗屎一樣的雜訊。(因為誤信他們,在此之前我已經跑了六次。)下面藍色的,才是目標DNA。
人家聲稱是已「最佳化」的PCR,不要信,自己跑一下才知道。要不跑出狗屎也當真,就不太好啦。
(不要問有些Lane為什麼這麼醜,我沒變Hulk用金居福爆橘拳捏爆他已經非常好脾氣了。)
#得罪了PCR小精靈
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【嚴重特殊傳染性肺炎】- 衛生福利部疾病管制署
衛生福利部中華民國 109 年 1 月 15 日衛授疾字第 1090100030 號公告,新增「嚴重特殊傳染性肺炎」為第五類法定傳染病。
2019年12月以來,湖北省武漢市展開呼吸道疾病及相關疾病監測,發現不明原因病毒性肺炎病例。個案臨床表現主要為發熱,少數病人呼吸困難,胸部X光片呈雙肺浸潤性病灶。
2020年1月9日接獲中國大陸通知,病原體初步判定為新型冠狀病毒,已完成病毒全長基因定序,電子顯微鏡下亦呈典型冠狀病毒型態,該病毒不同於以往發現的人類冠狀病毒。冠狀病毒(CoV)為一群有外套膜之RNA病毒,外表為圓形,在電子顯微鏡下可看到類似皇冠的突起因此得名。除已知會感染人類的七種冠狀病毒以外,其他的動物宿主包括蝙蝠、豬、牛、火雞、貓、狗、雪貂等。並有零星的跨物種傳播報告。
【疾病介紹】
∎最新消息及疫情訊息
∎新聞稿
∎致醫界通函
∎國際重要疫情
∎國際旅遊疫情建議等級
【重要指引及教材】
∎US CDC. 2019-Novel Coronavirus (2019-nCoV) Real-time rRT-PCR Panel Primers and Probes
∎社區監測通報採檢及個案處理流程
∎病例定義暨檢體採檢送驗事項
∎個案處置流程
∎具二級流行地
【Q&A】
∎本署QA
∎外部會QA
【重要表單】
∎防範武漢肺炎自主健康管理應注意事項
∎嚴重特殊傳染性肺炎檢驗陰性疑似病例自主健康管理通知書
∎嚴重特殊傳染性肺炎檢驗陰性疑似病例自主健康管理通知書(英文版)
∎防範新型冠狀病毒肺炎入境健康聲明暨居家檢疫通知書
∎防範新型冠狀病毒肺炎入境健康聲明卡
【宣導素材】
∎多媒體
∎海報
∎單張
∎手冊
∎廣播
#2019COVID19Decree
【Reference】
( 衛生福利部 - 疾病管制署 ) 疾病管制署 - 1922防疫達人
https://www.cdc.gov.tw/Dise…/SubIndex/N6XvFa1YP9CXYdB0kNSA9A
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【嚴重特殊傳染性肺炎】- 衛生福利部疾病管制署
衛生福利部中華民國 109 年 1 月 15 日衛授疾字第 1090100030 號公告,新增「嚴重特殊傳染性肺炎」為第五類法定傳染病。
2019年12月以來,湖北省武漢市展開呼吸道疾病及相關疾病監測,發現不明原因病毒性肺炎病例。個案臨床表現主要為發熱,少數病人呼吸困難,胸部X光片呈雙肺浸潤性病灶。
2020年1月9日接獲中國大陸通知,病原體初步判定為新型冠狀病毒,已完成病毒全長基因定序,電子顯微鏡下亦呈典型冠狀病毒型態,該病毒不同於以往發現的人類冠狀病毒。冠狀病毒(CoV)為一群有外套膜之RNA病毒,外表為圓形,在電子顯微鏡下可看到類似皇冠的突起因此得名。除已知會感染人類的七種冠狀病毒以外,其他的動物宿主包括蝙蝠、豬、牛、火雞、貓、狗、雪貂等。並有零星的跨物種傳播報告。
【疾病介紹】
∎最新消息及疫情訊息
∎新聞稿
∎致醫界通函
∎國際重要疫情
∎國際旅遊疫情建議等級
【重要指引及教材】
∎US CDC. 2019-Novel Coronavirus (2019-nCoV) Real-time rRT-PCR Panel Primers and Probes
∎社區監測通報採檢及個案處理流程
∎病例定義暨檢體採檢送驗事項
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【Q&A】
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∎嚴重特殊傳染性肺炎檢驗陰性疑似病例自主健康管理通知書
∎嚴重特殊傳染性肺炎檢驗陰性疑似病例自主健康管理通知書(英文版)
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∎防範新型冠狀病毒肺炎入境健康聲明卡
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#2019COVID19Decree
【Reference】
( 衛生福利部 - 疾病管制署 ) 疾病管制署 - 1922防疫達人
https://www.cdc.gov.tw/Disease/SubIndex/N6XvFa1YP9CXYdB0kNSA9A
pcr primers 在 Diseño de primers para PCR 的推薦與評價
Diseño de primers para PCR. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una metodología estándar en cualquier laboratorio de biología molecular y consta ... ... <看更多>